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2012-12
蛋白專題：PAGE膠上蛋白質(zhì)的銀染方法
PAGE膠上蛋白質(zhì)的銀染方法有數(shù)百種，其原理相似，具體步驟各不相同。銀染為蛋白質(zhì)的非特異性染色，呈“爆炸性”反應(yīng)模式，用于蛋白定量時準(zhǔn)確性差，但其敏感度高、簡便易行，仍被廣泛應(yīng)用。下面列舉的這三種方法...
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2012-12
蛋白專題：蛋白質(zhì)免疫印跡（Western Blot ）
蛋白質(zhì)免疫印跡（WesternBlot）可以：（1）從蛋白質(zhì)混合物中檢出目標(biāo)蛋白質(zhì)；（2）定量或定性確定細(xì)胞或組織中蛋白質(zhì)的表達(dá)情況；（3）用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)-DNA、蛋白質(zhì)-RNA相互作用后...
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2012-12
HRM-遺傳變異分析的新技術(shù)
高分辨率熔解（HRM）是一種基于雙鏈DNA在升溫時的解鏈行為的差異來區(qū)分不同的PCR產(chǎn)物的新技術(shù)。HRM技術(shù)的高分辨率使其得以區(qū)分即使是單個堿基的差異，因此該技術(shù)得以廣泛應(yīng)用于SNP分型、突變掃描、種...
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2012-12
細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗步驟
一、實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)和掌握外源基因?qū)胝婧思?xì)胞的主要方法——脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染。了解外源基因進(jìn)入的一般性方法，觀測外源蛋白的表達(dá)（綠色熒光蛋白），為染色準(zhǔn)備實驗材料。二、實驗原理上圖所示是脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染的示...
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2012-12
大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備、重組DNA的轉(zhuǎn)化、克隆篩選
1.實驗?zāi)康暮鸵笸ㄟ^本實驗學(xué)習(xí)氯化鈣法制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞和外源質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)入受體菌細(xì)胞的技術(shù)以及篩選轉(zhuǎn)化體的技術(shù)。了解細(xì)胞轉(zhuǎn)化的概念及其在分子生物學(xué)研究中的意義。2.相關(guān)知識及原理感受態(tài)細(xì)胞（C...
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2012-12
RNA提取過程經(jīng)驗分享
1.RNA提取的樣品很重要，包括樣品的質(zhì)量，細(xì)胞數(shù)，雜質(zhì)含量等等，建議：按照說明書的要求，每毫升TRIzol不超過100mg再低些在50mg左右;樣品的質(zhì)量一定要控制好；研磨得時間不宜過長，成粉狀即可...
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2012-12
一舉兩得！同時提取RNA和蛋白！
具體的提取步驟如下:1.樣品加氯仿分層后,移去上層水相（該水相里就是RNA，可照常繼續(xù)進(jìn)行RNA的提取）,加0.3ml乙醇沉淀中間層和有機相中的DNA，渦旋混合，室溫放置3分鐘，2-8℃不超過2000...