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感受態(tài)專題：細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
更新時(shí)間：2013-11-06 瀏覽次數(shù)：1046
原理：
通過脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法及電穿孔等基因轉(zhuǎn)染技術(shù)，將靶基因?qū)爰?xì)胞，一般在轉(zhuǎn)染后48小時(shí)左右，靶基因即可在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?8小時(shí)后即可進(jìn)行靶基因表達(dá)的檢測等實(shí)驗(yàn)。
應(yīng)用：
觀察目的基因及其表達(dá)蛋白在某種細(xì)胞中的功能（短時(shí)間即可進(jìn)行觀察，但效應(yīng)會(huì)很快丟失）。
一般流程：
1）細(xì)胞接種：轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)前天接種細(xì)胞，各種細(xì)胞的平板密度依據(jù)各種細(xì)胞的生長率和細(xì)胞形狀而定。進(jìn)行轉(zhuǎn)染當(dāng)天細(xì)胞密度應(yīng)達(dá)到60%~80%覆蓋。
2）細(xì)胞轉(zhuǎn)染（脂質(zhì)體、電穿孔、FuGENE6等）
3）48小時(shí)以后鑒定目的基因的表達(dá)情況。
前期準(zhǔn)備：
l構(gòu)建好的外源基因載體，或目的基因基本信息。
l待轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系（1×106個(gè)細(xì)胞，可傳代，倍增時(shí)間小于48小時(shí)）以及細(xì)胞培養(yǎng)條件的說明。
l若需要檢測靶基因的表達(dá)，請?zhí)峁┫鄳?yīng)抗體。
結(jié)果呈現(xiàn)：