生物化學(xué)技術(shù)專題：皂苷的鑒別
更新時(shí)間：2014-01-14 瀏覽次數(shù)：1155
1．檢品溶液的制備：
1）取皂角碎塊1g于大試管（或小燒杯）中，加蒸餾水15ml，于30~90°水浴上浸漬15分鐘后過濾，濾液供鑒別用。
2）取薯蕷碎塊0.5g加上法同樣制備得薯蕷水浸液。
3）取薯蕷碎塊0.5g于大試管或小錐形瓶中加95%乙醇10ml于水浴上溫浸15分鐘，濾液供鑒別。
2．鑒別試驗(yàn)：
（1）溶血試驗(yàn)：取濾紙片一小塊，于小心處滴加皂角浸液一滴，待干后于同處再滴加一滴，如是反復(fù)操作至滴加數(shù)滴，干燥后無噴霧血球試液（取牛血、羊血或兔血一份，用玻棒或棉簽攪和，除去凝集的血蛋白，加pH7.4磷酸鹽緩沖液一份稀釋即得），數(shù)分鐘后觀察在紅色的背底中是否出現(xiàn)無紅色的黃色（或透明）斑點(diǎn)（中心處皂解浸液原點(diǎn)）。（本反應(yīng)亦可在試管中進(jìn)行，血球試液中草藥浸液中的皂苷溶解后，血球液由渾濁變?yōu)槌蚊?。此外還可在載玻片上進(jìn)行，并在顯微鏡下觀察血球破裂溶解前后的狀況）。
（2）泡沫試驗(yàn)：薯蕷浸液，皂角浸液各2ml，分別置于試管中。用力振搖一分鐘后放置，在10分鐘內(nèi)觀察二管是否都有持久性泡沫產(chǎn)生？
（3）醋酐濃硫酸試驗(yàn)（Liebermann-Burchard反應(yīng)），皂角浸液5ml，于蒸發(fā)皿中在水浴上蒸干，加入1ml醋酐使其溶解，滴于干燥比色盤中，從邊沿緩緩滴加濃硫酸1滴，觀察顏色變化。
另取薯蕷浸液5ml，置于蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干，加入1ml醋酐溶液，并傾入比色盤中，（試管）沿管壁加入幾滴濃硫酸，觀察界面間是否有紫紅色環(huán)產(chǎn)生？
（4）氯仿-濃硫酸試驗(yàn)（Salkowski反應(yīng)）：取薯蕷醇浸液2ml，在水浴上蒸干，有氯仿1ml溶解，轉(zhuǎn)入干燥小試管中，沿壁小心加濃硫酸1ml，氯仿層顯紅或蘭色，硫酸層有綠色熒光，示含甾體皂苷。