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免疫學(xué)技術(shù)專題：中性粒細(xì)胞吞噬功能的測定
更新時間：2014-06-18 瀏覽次數(shù)：1499
中性粒細(xì)胞（polymorphonuclear leukocyte，PMN）的功能包括粘附、移動、吞噬殺菌等，是機體天然免疫力的重要組成部分。
試劑及材料
1. 白色葡萄球菌
2. 肉湯培養(yǎng)基
3. 鹼性美藍(lán)液
操作方法
1. 菌液的制備 將白色葡萄球菌接種于中，放37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)12h左右；置水浴中加熱100℃ 10min殺死細(xì)菌，用無菌生理鹽水稀釋成6×108 細(xì)菌/ml備用；
2. 用血紅蛋白吸管吸取受試者耳垂或指血40μl，立即加入盛有20μl肝素（濃度為20U/ml）的潔凈凹玻片的凹孔內(nèi)，輕輕攪動混勻， 再加上述葡萄球菌菌液20μl充分混勻。然后置入鋪有濕紗布的有蓋容器內(nèi)（此容器先放37℃溫箱中預(yù)溫），在37℃溫箱中作用30min，其間每隔10min搖勻一次；
3. 作用完畢，取1小滴混合液置于潔凈無油污的載玻片一端，推成薄片。待干后，用甲醇固定4～5min，鹼性美藍(lán)液染2～3min，置油鏡下觀察。隨機計數(shù)100個中性粒細(xì)胞，分別記錄發(fā)生吞噬和未吞噬的白細(xì)胞數(shù)，對有吞噬作用的白細(xì)胞，應(yīng)同時記錄所吞噬的細(xì)菌數(shù)；
結(jié)果分析
吞噬細(xì)胞%=即100個中性粒細(xì)胞中吞噬有細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)；
吞噬指數(shù)=將100個中性粒細(xì)胞所吞噬的細(xì)菌總數(shù)除以100，得到每個白細(xì)胞吞噬細(xì)菌的平均數(shù)，即為吞噬指數(shù)。